免疫组库研究手段多样,如多重PCR、5’RACE等,但传统方法难以精确掌握单个细胞的BCR和TCR状态,难以实现TCR/BCR双链的精确匹配。2015年,10x Genomics推出的Chromium单细胞系统平台,利用微流控与油滴封装技术,实现高通量单细胞转录组与单细胞V(D)J测序,不但能完美匹配TCR/BCR双链,还能深入单细胞层面,获取表达谱信息。当前,该技术已成为单细胞免疫组库研究的主流技术。那么,如何分析10x单细胞免疫数据?分析结果包括哪些内容?本文将探讨单细胞免疫组库测序数据分析的相关话题。

首先,VDJtools工具能快速处理免疫组库数据。针对10x vdj数据,VDJtools同样适用。以下是具体步骤与结果:

1. 软件下载:Linux用户可从指定链接下载zip安装包,内含所需jar文件,无需编译,下载即用。VDJtools绘图需调用R,因此需先安装相关R包,可通过VDJtools命令一键安装。

2. 输入文件格式:包括示例数据下载,数据格式说明,以及输入数据需用制表符分隔等。

3. 格式转换:对10x免疫组库数据,利用cellranger得到结果后,从filtered_contig_annotations.csv中提取信息,转换成所需格式。

4. 分析:VDJtools包含六个分析模块,包括基础信息统计、多样性评估、样本间overlap、过滤与重采样、Clonotype操作和注释等。

接下来,详细介绍了VDJtools各模块的使用方法及结果展示。通过高效分析,10x单细胞免疫组库数据能呈现出高品质的图谱。若对单细胞免疫组库研究感兴趣,欢迎与我们联系。

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